细菌的培养和生长现象的观察

发布时间2013-07-29        浏览次数：1077

一、实验目的
    1.了解常用培养基的种类。
    2.掌握无菌操作，建立无菌观念。
    3.初步掌握细菌接种技术。
    4.学会观察细菌在常用培养基上的生长现象。
    二、实验材料
    1.菌种葡萄球菌、大肠埃希菌。
    2.培养基普通琼脂平板、斜面培养基、半固体培养基、液体培养基。
    3.器材接种环、接种针、酒精灯、培养箱、试管架等。
    三、实验内容
    (一)细菌的接种方法
    平板划线接种法分离培养法)
    【实验原理】
    通过在平板上划线，将混杂的细菌在琼脂平板表面充分的散开，使单个细菌能固定在一点生长形成单个菌落，以达到分离纯种的目的。若需从平板上获取纯种，则挑取一个菌落做纯培养。
    【操作方法】(分段划线法)
    1.右手拿接种环，烧灼冷却后，以无菌操作方法蘸取细菌标本少许。
    2.左手持琼脂平板，以左手拇指和食指将平板盖启开，右手将取了菌液的接种环伸人平板，将已葫菌的接种环在琼脂表面密集而不重叠地来回划线，面积约占整个平板的1/6- 1/5，此为区划线。
    3.将接种环置于火焰上灭菌，冷却后(可接触平板试之，如不融化琼脂，即已冷却)，开始第二区来回划线，且在开始划线时与区的划线相交数次(2-3次为宜)，以后划线不再相交。
    4.后用同样方法进行第三区，必要时也可继续第四区、第五区划线(图5-1)     5.接种完毕，接种环经火焰灭菌后，放回原处;盖好培养皿盖子，倒置(平板底部向上)，做好标记;放37℃温箱培养18-24h后，观察结果。注意是否分离出单个菌落，并记录菌落特征如大小、形状、透明度、色素等。
    【注意事项】
    1.严格无菌操作，避免空气及呼吸道中的细菌落人培养墓内。
    2.划线接种时，角度、力度要掌握好，接种环与琼脂成30°~40°角轻轻接触，利用腕力滑动，切忌划破琼脂，并充分利用平板的表面积，以达到分离的目的。