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猪瘟的流行净化以及检测试剂盒解读

发布时间2019-09-17        浏览次数:200

目前猪瘟流行多为猪瘟的变异株——2.1型,中国C株为1型,针对C株免疫产生的抗体对于变异株的防控效果,有待具体数据的支持;但市场上免疫C株疫苗针对猪瘟的防控还是有一定效果的。2、猪瘟疫苗的选择,并不是兔体感染量/病原含量的高低就能决定的,要结合猪场的免疫程序,以及免疫效果进行选择,尤其是进行首免猪瘟疫苗时,母源抗体的干扰有可能导致免疫失败,建议疫苗免疫要适量。3、针对猪瘟疫苗免疫的评价,爱德士公司包被的抗原为猪瘟的E2蛋白,LSI公司包被的为猪瘟全病毒,不同试剂盒检测的结果出入较大,对于结果的分析是一大问题,因此需要结合猪场的实际情况,有必要时可结合相应的病原检测分析。

一、猪瘟流行情况
通过我们的检测数据显示,目前猪瘟处于不稳定状态;猪瘟C株属于1型,目前我国流行毒株大多为2.1型的。种猪的带毒率一直是比较高的,大约为8.7%左右,目前猪瘟又呈现不稳定的状态。主要表现为1.毒株变异2.蓝耳发病率升高导致免疫抑制,继而混发猪瘟。3.种猪带毒,胎盘传播形成猪瘟耐受。

二、猪瘟免疫情况
一些猪场遇到这样的问题,反复免疫猪瘟疫苗,没有抗体?
如果母猪带毒,病毒经过胎盘后感染了胚胎,此时仔猪的免疫系统会将病原认为是自身的物质,不会产生免疫应答,出生后再次免疫疫苗时会有免疫不应答情况,这种猪瘟病毒一般是温和型的。
如果母猪在妊娠后期免疫,并且免疫量过大,存在免疫抑制传播至胎盘,也可能导致仔猪免疫耐受。

三、猪瘟抗体检测
分享猪瘟野毒抗体检测的一个实际案例
我们有时在追求猪瘟疫苗免疫后抗体阻断值与离散度,一般认为阻断值高于80,离散度低于20%为佳。但是我个人认为,这个标准只适合种猪的反复加强免疫后的结果,由于仔猪吃初乳的时间不同,吃的乳头不同,其母源抗体滴度我是不同的,一般越早吃的初乳含的IgG含量越高,前排的乳池中的乳汁质量越高,因此同一窝中仔猪的母源抗体差别是比较大的。母源抗体会干扰免疫后抗体滴度,因此一免后关注抗体阳性率即可,滴度不会太高,此外其实从免疫机理上猪瘟主要是细胞免疫,有时没有抗体也能保护。
分享实验案例
我们曾经做过一个实验,用750兔体感染量的疫苗免疫5头仔猪,设5头空白对照,免疫后一个月采集血清检测抗体,免疫组只有两头阳转;但是攻毒后,5头免疫组全部保护,5头对照全死亡;这时检测抗体,抗体阻断值全部超过90%,离散度10%左右。
如何证明存在第3点的问题?一些猪场的问题,猪场在免疫后不是没抗体,而是抗体太高了,24周龄还有95%抗体阳性率,怀疑野毒感染肉猪。
免疫了合适剂量的疫苗后,虽然检测离散度不是很好,但也会对猪起到一定的保护作用,在实际的生产当中不要过度的依赖离散度的高低,需要根据自己厂里实际的情况而定。
离散度与做疫苗的方法有很大关系,没有几个场能完全按照流程来做。现在很多猪场老板懂得并没有他们想象的那么多,实验室做的很多效果很好的苗让他们注射时zui容易出现疏忽,zui后还把责任归到疫苗本身!我觉得应该把如何做苗这个zui基本的要求和流程落实到各个场,这样大家的工作才zui有意义!

四、不同试剂盒检测猪瘟抗体情况
国外的试剂盒大多都是阻断的,如金诺韩国和西班牙英吉娜的,以及美国爱德士和法国LSI的检测试剂盒都是阻断ELISA。阻断ELISAzui大的优势就是准确,不容易被干扰,背景值低,这些盒子大多是包被的猪瘟E2蛋白,是针对单克隆表位的。一般由于个体差异,宿主针对某一单一表位的抗体滴度会有很大差异,因此,在某些特殊情况下其数值是有差异的。
国内的试剂盒大多是间接ELISA,包被的是一段抗原,多个表位。因此有时需对照的看,如果毒株变异,正好在阻断ELISA的单一表位处变异,可能得出的结果是阴性的。
国家疫病防控中心遇秀玲有一个实验数据:爱德士阴性,LSI都是阳性。
在此提问:不同厂家猪瘟疫苗的效果?每头份兔体感染量,差异很大,是否越高越好?
回答:这个很敏感,因场而异,应该适中;太低、太高了,均受母源抗体干扰比较大。因为猪瘟母源抗体具有中和活性,如果仔猪恰处于母源抗体高峰期会被中和,不但没起到正面效果,还会消耗母源抗体。
爱德士包被的是E2蛋白,LSI包被的是全病毒,所以通常爱德士的结果看起来没那么好,就是一个特异性和敏感性怎么取舍的问题。
E2蛋白是猪瘟病毒诱导机体产生中和抗体的主要保护性蛋白,爱德士检测的抗体与中和抗体无相关性。
兔体感染量是一个不太准确的标定抗原的方法。有一个客户,将一头份的猪瘟疫苗注入兔子体内,没有引起发热,认为猪瘟疫苗不合格。但用wo荧光定量PCR检测,抗原合格。咨询生产一线人员,必须对兔子有要求:兔子品种有要求,5至6斤兔子,不能打兔瘟疫苗。







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