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非洲猪瘟检测中窗口期的确定方法

发布时间2019-06-24        浏览次数:981

    非洲猪瘟病毒的附着力到底有多强?直接接触或者携带病毒的物品再次传播的能力有多强?尚不清晰。目前已知非洲猪瘟是高度接触性传播的急性、烈性病毒,主要通过接触或采食受非洲猪瘟病毒污染的物品,以及通过昆虫吸血而传染。短距离可经空气传播、污染的饲料、泔水、剩菜及肉屑、栏舍、车辆、器具和衣服等均可间接传播本病。今天我们主要介绍非洲猪瘟检测中窗口期的确定方法。
    确定猪只是否处于窗口期的方法很多,如病毒培养法、免疫组织荧光法、抗原检测法等,但当前成熟的方法还是定性或定量的聚合酶链式反应(PCR)法。
    检测样本的选择 根据研究数据,口腔拭子、鼻腔拭子都可以作为窗口期的检测样本,但是新鲜分泌的唾液往往具有大的检测,其病毒含量远远高于口腔拭子和鼻腔拭子。新鲜分泌的唾液中非洲猪瘟病毒CT值比口鼻拭子中的非洲猪瘟病毒CT值平均低5左右。
    唾液样本处理 处于窗口期的猪只,尚具备较强的特异性免疫能力和非特异性免疫能力,机体对病毒的清除作用较强,两者处于激烈对抗状态,尤其是唾液中的酶(溶菌酶、核酸酶、碱性磷酸酶等)活性较高,收集到唾液中的非洲猪瘟病毒如果含量过低,病毒很快将被唾液降解。因此,采集的唾液必须立即进行核酸保护(即抑制唾液中的酶活性)。
    唾液样本检测 由于处于窗口期内唾液样本中非洲猪瘟病毒含量较低,对检测条件的要求较为苛刻。建议对检测环境(温度、空气、水、操作台面)、检测试剂套装、检测仪器进行比对和考核,慎重选择。为了取得优质的唾液样本,采样之前需要对动物进行禁食处理(12小时)。
    研究证实,试管唾液中的病毒在静置或离心状态下,底部的非洲猪瘟病毒含量远远高于试管上清中的病毒含量(CT值相差1~3),所以建议从试管底部取样进行检测。
    实施实验室检测工作之前,建议对操作人员进行科学采样和取样培训,培训合格后才允许从事检测工作。








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