PCR扩增仪扩增实验的产检污染问题
发布时间2016-08-08 浏览次数:1361
PCR扩增仪扩增实验的产检污染问题
卫生部为临床PCR扩增仪实验室分区的要求是分为:
1)试剂准备区;
2)标本准备区;
3)PCR扩增区;
4)产物分析区。各工作区要有一定的隔离,操作器材专用,人员进出有缓冲间,器材传递的方向性也按上述顺序进行。切不可将扩增区和产物分析区的产物及器材拿到其它两个工作区。
PCR扩增仪常见的污染包括:
1)模板污染在核酸提取过程中,由于标本的容器污染、容器外粘有标本、移液器污染和试剂污染等因素造成标本被污染。分子生物学实验室常常采用克隆质粒作为阳性对照,由于克隆质粒在单位容积内含量很高,且在活细胞内的质粒具有很强的生命力,实验室中克隆质粒的污染也很常见。
2)PCR扩增仪产物污染 PCR产物拷贝量很大(一般为10的13次方拷贝/ml),而PCR检测仅需数个拷贝就可以扩增阳性,所以微量的PCR产物污染,就可形成假阳性。其中可能造成PCR产物污染的形式是气溶胶污染。